亚洲精品无码久久久久苍井空,亚洲精品一区三区三区在线观看,女人做爰全过程免费观看美女,亚洲第一网色综合久久红第一

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 細(xì)胞不貼壁的原因及解決方案參考
細(xì)胞不貼壁的原因及解決方案參考
點(diǎn)擊次數(shù):345 更新時(shí)間:2024-04-08

       細(xì)胞貼壁是細(xì)胞(除腫瘤細(xì)胞外)在體外培養(yǎng)條件下,完成貼壁后均為單層生長,原因是貼壁細(xì)胞有接觸性抑制的特點(diǎn)。一般認(rèn)為接觸抑制是細(xì)胞間的一種識別作用,對于動物細(xì)胞的形態(tài)形成與穩(wěn)定具有重要性的作用。由于貼壁細(xì)胞的一面是緊貼在培養(yǎng)瓶上的,如果其上方存在細(xì)胞與其相粘附,那么下方的細(xì)胞很快就會缺乏營養(yǎng)餓死。

不貼壁的一些原因:

1. 胰酶消化時(shí)間把控不當(dāng):消化不夠細(xì)胞本身就是成團(tuán)的;若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞膜蛋白損傷,使細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。

2. 缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養(yǎng)基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細(xì)胞的貼壁效果會下降很多。

3. 支原體或細(xì)菌的污染。

4. 培養(yǎng)液配制、儲存不當(dāng),如pH值過堿,Gln量太少等原因。

5. 復(fù)蘇的細(xì)胞本身狀態(tài)不好,已經(jīng)老化,失去貼附性。

6. 接種細(xì)胞數(shù)目太少,無法分泌足夠的細(xì)胞外基質(zhì)。

7. 復(fù)蘇時(shí)處理速度太慢,復(fù)蘇過程不當(dāng)。

如何促進(jìn)細(xì)胞貼壁:

1. 適度消化細(xì)胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。

2. 最好用塑料瓶培養(yǎng),如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養(yǎng)瓶,或者用鹽酸對培養(yǎng)瓶進(jìn)行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細(xì)胞貼附新的培養(yǎng)瓶,細(xì)胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。

3. 正確配制消化液或培養(yǎng)液。

4. 使用合適的細(xì)胞外基質(zhì)或貼壁試劑。

5. 復(fù)蘇新的細(xì)胞,第一周用20%血清幫助細(xì)胞復(fù)原。

6. 傳代接種一定要鋪的均勻,避免細(xì)胞抱團(tuán)生長。

7. 細(xì)胞傳代24小時(shí)之內(nèi),最好不要晃動,以免影響貼壁。

8. 體內(nèi)上皮細(xì)胞生長在膠原構(gòu)成的基膜上,因此培養(yǎng)在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細(xì)胞培養(yǎng),可以用γ射線照射后的3T3細(xì)胞為飼養(yǎng)層,另外降低pH、Ca2+含量和溫度,均有利于上皮細(xì)胞生長。


成人乱短篇500章小说| 性videostv另类极品| 初次尝了销魂少妇邻居| 欧美与黑人午夜性猛交久久久| 亚洲精品无码高潮喷水a片| 麻豆md0077饥渴少妇| 无码人妻一区二区三区精品视频| 亚洲欧美成人无码久久久| 天美传媒剧国产剧情MV公司| 久久久久亚洲av无码专区| 365天今时之欲| 粗大好烫轻点太深好硬好涨视频| 猎户边走边挺进她的h| 欧美超级乱婬视频播放| 少妇与邻居做爰| 按摩师按的我下面有水流出来| 2023国精产品一二二线精华液| 少妇大叫太大太粗太爽了| 国产精品久久久久一区二区三区| 丰满多毛的大隂唇特写图片| 国产一区二区草草影院| 杨思敏1一5集未删减| 无码人妻丰满熟妇啪啪欧美| 亚洲色综合狠狠综合区| 性欧美xxxxx老少交| 亚洲日韩精品欧美一区二区| 无颜之月在线看| 双天至尊第一部| 真人性做爰无遮a片免费| 伊人久久大香线蕉AV影院| 中文字幕在线观看| 人妻夜夜爽天天爽三区麻豆av网站| 成人精品一区二区三区电影| 国产又粗又大又硬又长又爽| 色婷婷久久综合丁香五月狠狠野花| 精品呦啊呦v视频在线观看| 精品无人国产偷自产在线| 55岁大妈玩csgo| 日韩精品无码一区| 成全视频在线观看免费高清| 亚洲av夜夜欢一区二区三区|